RT-PCR Diagnostik von nosokomial übertragbaren Hämorrhagische-Fieber Viren

In dieser Arbeit wurde eine konventionelle RT-PCR für die wichtigsten nosokomial übertragbaren hämorrhagische Fieber auslösenden Viren (Marburg-, Ebola-, Lassa-, Krim-Kongo Hämorrhagisches Fieber Virus) mit einer real-time RT-PCR auf dem Roche LightCycler verglichen. Dabei zeigte sich, dass die konv...

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Main Author: Gebhard, Jos Tilmann Wolf
Contributors: Becker, Stephan (Prof. Dr.) (Thesis advisor)
Format: Doctoral Thesis
Language:German
Published: Philipps-Universität Marburg 2013
Subjects:
Online Access:PDF Full Text
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Description
Summary:In dieser Arbeit wurde eine konventionelle RT-PCR für die wichtigsten nosokomial übertragbaren hämorrhagische Fieber auslösenden Viren (Marburg-, Ebola-, Lassa-, Krim-Kongo Hämorrhagisches Fieber Virus) mit einer real-time RT-PCR auf dem Roche LightCycler verglichen. Dabei zeigte sich, dass die konventionelle RT-PCR der real-time RT-PCR in Punkto Sensitivität und Performance deutlich überlegen ist. Es konnte gezeigt werden, dass die konventionelle RT-PCR ein hoch-sensitives Verfahren ist, bei dem sich zudem die Richtigkeit des Ergebnisses durch die Integrierung einer internen Kontrolle ohne Sensitivitätsverlust verifizieren lässt. Außerdem wurden die RT-PCR Protokolle so ausgelegt, dass sie gleichzeitig in einem PCR-Cycler laufen können. Des Weiteren wurde getestet, ob die Reaktionsansätze für die Multiplex RT-PCR zur Komplettierung vorpipettiert für ihren Einsatz bereit gehalten werden können. Die Funktionalität konnte für mindestens ein Jahr sichergestellt werden.
DOI:10.17192/z2013.0283