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Differenzierungsabhängige Expression des Proteinase-aktivierten Rezeptor 2
Der G-Protein-gekoppelte Proteinase-aktivierte Rezeptor-2 (PAR-2) wird insbesondere von intestinalen Epithelzellen exprimiert und im jeweiligen Abschnitt des Gastrointestinaltrakts z.B. durch Trypsin oder Mastzelltryptase aktiviert. Auch in anderen Geweben (z.B. Pankreas, Niere, Leber, Atemwege un...
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| Main Author: | |
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| Contributors: | |
| Format: | Doctoral Thesis |
| Language: | German |
| Published: |
Philipps-Universität Marburg
2009
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| Subjects: | |
| Online Access: | PDF Full Text |
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| Summary: | Der G-Protein-gekoppelte Proteinase-aktivierte Rezeptor-2 (PAR-2) wird insbesondere
von intestinalen Epithelzellen exprimiert und im jeweiligen Abschnitt des Gastrointestinaltrakts z.B. durch Trypsin oder Mastzelltryptase aktiviert.
Auch in anderen Geweben (z.B. Pankreas, Niere, Leber, Atemwege und Haut)
wurde PAR-2 nachgewiesen und übernimmt hier ebenfalls wichtige Funktionen. Im Intestinaltrakt haben differenzierte Epithelzellen eine Vielzahl von Aufgaben wie z.B. Flüssigkeits- und Elektrolythaushaltsregulation, Sekretion von
Verdauungsenzymen und Protektion bei mikrobiellem und parasitärem Befall. Unser
Interesse war daher, die Genexpression von PAR-2 abhängig vom Differenzierungsgrad intestinaler Epithelien darzustellen und einen möglichen Zusammenhang zwischen diesen und anderen Aufgaben und dem Rezeptor aufzuzeigen.
Um ein möglichst umfassendes Bild abzugeben, wurden in Zellkulturexperimenten
verschiedene intestinale Zelllinien (HT29, Caco2, IEC-6 Cdx2, hBRIE 380) zur
Differenzierung angeregt und anschließend mittels quantitativer RT-PCR die
Genexpression abhängig vom Differenzierungsgrad der Zellen gemessen. Analoge
Messungen wurden auch an Gewebeproben aus dem humanen Intestinaltrakt und dem
Dünndarm der Maus durchgeführt.
Als Differenzierungsmarker wurde die Gene hsSI und Cdx2, die bekanntermaßen
spezifisch im differenzierten Kompartiment der intestinalen Krypte-Villus Achse
exprimiert werden, eingesetzt. Des Weiteren wurde in den Zellkulturexperimenten
mittels Enzym-Assay die Enzymaktivität der Dipeptidylpeptidase IV (DPPIV)
bestimmt, da man weiß, dass höher differenzierte Zellen eine vermehrte Enzymaktivität aufweisen. Die Resultate unserer Experimente und Messungen zeigen einen direkten Zusammenhang zwischen Zelldifferenzierung und Höhe der PAR-2 Genexpression: PAR-2 wird sowohl in vitro als auch in vivo vermehrt durch differenzierte Epithelzellen des Intestinaltraktes exprimiert. |
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| Physical Description: | 82 Pages |
| DOI: | 10.17192/z2009.0682 |